雄性野生型小鼠在房屋中繁殖并在3周内断奶或从杰克逊实验室获得（库存号000664）。β-arr2-ko小鼠（库存011130）是从杰克逊实验室获得的，在房屋中繁殖并在3周龄时断奶。所有小鼠均被杂交C57BL/6J高基因的“野生型”菌株（与本研究中未使用的杂种“ True Wild”相反）。先天性菌株是通过反向交叉至少10代的产生的，该标准是由先天间隔得出的，并且理论上的估计值是，到第10代，99.99％的恒星菌株背景将来自接受者Inbred69。尽管最初衍生在129x1/svj背景70上的β-arr2-ko鼠标（杰克逊实验室库存第011130号），但在杰克逊实验室（https://wwwwwwwwwww.jax.org/strain/011113）又回到了C57BL/6J Encenig straine。所有小鼠均在12小时：12小时的自然光线：黑暗周期，从07:30开始，随意提供食物和水。所有行为实验均在同一昼夜节律时期（07：30-19：30）进行，在专用的，声音和声音控制的行为测试室与体内分离，并且在同一房间中没有同时进行其他实验。根据先前的工作和已发表的文献估算样本量。当将主观标准用作数据分析的组成部分时，实验者对这种情况视而不见，对照和测试条件交错。将小鼠随机分配到实验组和对照组。所有程序都符合美国国立卫生研究院提出的动物护理标准，并符合约翰·霍普金斯大学动物护理和使用委员会批准的方案。

　　SCPP的协议改编自先前发布的Work11。在含有玉米cob床上用品的笼子（安德森柯布，0.25英寸棒，动物特色和食物）中，在社会上容纳小鼠（3-5名男性），直到预先确定的SCPP测试年龄为止。每只鼠标仅用于一个行为时间点。在预定的年龄中，将小鼠放置在配备红外光束和软件接口（活动监视器，MED Associates）的开放田活动室（Env-510，Med Associates）中，以监视小鼠的位置。使用透明的有机玻璃壁将该设备分为两个同等大小的区域，底座的直径为5 cm。每个区域都包含一种新型床上用品（Alpha-Dri，动物特色和食品或Kaytee软颗粒，Petco）。在30分钟的测试课程中记录了每一个区域的自由探索时间。例如，得分为900，这意味着鼠标完全花了50％的时间在两个床上床上，而得分为1,800，这意味着它在床上用品中花费了整整30分钟的时间，随后将被分配为社会条件提示，而在床上层中没有时间将其分配为孤立的条件条件。在初步的预先调查试验建立了两组床上用品线索的基线偏好之后，将小鼠分配在一种类型的床上用品上接收社会条件（与笼子伴侣）24小时，然后在其他床上用品提示上进行24小时的隔离条件（无笼子）。为了确保无偏设计，室内分配是在侧面和床上用品线索中平衡的。隔离条件后，立即进行了30分钟的调节试验，以确立对这两个条件提示的偏好。CPP是条件（例如，社交）和提示（床上用品）之间的学识渊博的关联。它不需要其他老鼠的气味， 因为床上用品本身是提示。该行为的排除标准严格定义为> 1.5或<0.5的预调节优先评分。从未根据其社交互动的质量排除小鼠。如果配对的学生的t检验P值小于0.05，则预处理与调节后的社会偏好得分被认为是显着的。实验条件之间的比较是使用归一化的社会偏好分数（在治疗后的社会区域中花费的时间除以预处理的时间）和减去社会偏好分数（减去社会区的时间）；如果未配对的学生的t检验p值<0.05，则认为这些很重要。所有实验均在小鼠休息期间（光周期）进行，因为试验实验表明，如果在此期间进行测定，SCPP是最健壮的。在I.P.之前药物治疗实验（MDMA，LSD，psilocybin，氯胺酮或盐酸ibogaine），小鼠使用每日盐水i.p.习惯于注射手术。在家笼中注射。药理学分娩时间表是药物类型的平衡。除非另有说明（图2和扩展数据图5），对于预处理，在注射后48小时测试了实验小鼠，以允许完全清除药物。对于5-HT2AR的实验测试参与，对5-HT2AR拮抗剂酮蛋白进行了腹腔注射。注射药物之前的30分钟。

　　受试者收到了I.P.注射LSD（1 µg kg -1），氯胺酮（3 mg kg -1），psilocybin（0.3 mg kg -1），MDMA（10 mg kg -kg -1），ibogaine（40 mg kg -kg -1）或盐水。药物治疗后48小时，使用标准程序制备了MPFC（250 µm厚）的含有NAC核心（250 µm厚）的副层切片，或使用标准程序制备了MPFC（250 µm厚）的冠状切片。简而言之，将小鼠用异氟烷麻醉并斩首后，将大脑迅速去除并放入冰冷的低钠，高核解剖溶液中（228 mm蔗糖，26 mm Nahco3，26 mm Nahco3，11 mm葡萄糖，11 mm葡萄糖，2.5 mm KCl，2.5 mm KCl，1 mm Nah2po4，1 mm Nah2po4，1mmmmmmmgso 4，0.5毫米，0.5毫米，0.5毫米，0.5毫米，0.5毫米，0.5毫米，0.5毫米，0.5毫米，0.5毫米，0.5毫米，0.5毫米，c。用Leica VT 1200s振动微型组收集切片。允许切片在含有人工脑脊液（ACSF）的淹没储物室（25°C）中恢复至少60分钟，该室由119 mm NaCl，2.5 mm KCl，2.5 mm CaCl2，2.5 mm CaCl2，1.3 mm MGCL2，1.3 mm MGCl2，1 mm Nah2po4，1 mm Nah2po4，11 mm Nah2po4，11 mm Glucose和11 mm Glucose和26.2mmmMM NAHCO3。对于增强性记录（扩展数据图6），将切片从保持室中取出并放入记录室中，在25°C下，在2 ml min -1下，它们连续用氧化（95％O2，5％CO2）ACSF灌注。对于元塑性记录（图4），将切片从保持室中取出，并在含有氧化的ACSF中首先孵育10分钟，其中含有picrototoxin（50 µM，Sigma），然后在含氧的ACSF中孵育10分钟的ACSF，将ACSF均含有含氧毒素和氧化毒素和氧蛋白（1 µm，tocris），并被放置在记录中。使用40倍物镜在视觉对照下获得了来自MSN或V层锥体细胞的全细胞电压钳记录。NAC核是通过前；通过前置连合，MPFC的PL/IL区域通过callosum call体的小小的存在来鉴定。记录是用电极（2.5-4.0MΩ）填充的，填充有115 mm CSMESO4，20 mm CSCL，10 mm HEPES，0.6 mM EGTA，2.5 mm MGCL， 10 mM磷酸钠，4 mM ATP，0.3 mM GTP和1 mM QX-314。在四毒素（0.5μM，Tocris Biosciences）和Picrotoxin（50μM，Sigma）存在下，以-70 mV的保持电位收集微型EPSC。闯入两分钟后，使用Igor Pro软件中的录制艺术家插件（将阈值参数设置为5 pa振幅且<3 ms的上升时间）中获取了30秒的事件（每个单元格总计200个事件）。最终数据分析中包含的所有事件均已视觉验证。通过具有三个独立变量（药物，大脑面积和年龄）和两个因变量（频率和振幅）的方差（MANOVA）的多元分析（MANOVA）分析数据。使用治疗，年龄和结构与使用年龄和结构的减少模型进行比较的可能性比测试进行了比较。所有计算均在GraphPad Prism 9或R编程语言中执行，并作为补充代码1和https://github.com/genesofeve/dolenpsychedelicopenstate提供。

　　注射雄性野生型C57BL6/J小鼠。使用LSD，氯胺酮，可卡因（20 mg kg -1）或盐水溶液，无论小鼠被安乐死前2周或48小时。在P98至P112时，将小鼠安乐死，迅速去除大脑，并使用小鼠脑基质将含有伏隔核的细胞核的〜1mm厚的冠状切片（n = 3小鼠）分割。为了微解至NAC，将切片放入含有冰冷ACSF（125 mm NaCl，2.5 mm Kcl，2 mm Kcl，2 mm CaCl2，1 mm mgcl2，1.25 mm NaH2PO4，1.25 mm NAH2PO4，10 mm NaH2PO4，10 mm NAHCO 3）中的含有RNASE和氧气的26 mm NaHCO3）的（25毫米MM MMMMGCL2，1.25 mm MMMMMGCL2）中的片段中的切片。至pH 7.3–7.4。使用前连合和其他结构标记鉴定了NAC。在每次解剖之间，更换叶片，并用含有RNase抑制剂的溶液清洁所有仪器和基质。解剖后，立即将组织放入0.5 mL Trizol中，并用组织均匀的液体裂解15秒以裂解细胞。在-20°C存储之前，将样品保存在冰上。使用Qiagen的Rneasy试剂盒提取总RNA。通过Agilent的纳米体和2100个生物分析仪评估了纯化的RNA的质量。使用推荐方案使用TRUSEQ绞合的mRNA试剂盒（Illumina）进行库制备。单个双指标库在单个S1 FlowCell上的Novaseq 6000平台上进行了质量控制，合并和测序，平均深度为76,841,745（±8,066,939.82），每个样品的平均深度为100 bp。使用Kallisto（V0.46.2）使用100个自举样品和6个线程，将读取对鼠标Gencode VM25（参考71）参考转录组进行假校准。默认值用于所有其他参数。估计的转录水平丰度折叠至基因级表达估计值，并使用侦探（V0.30.0）进行分析（V0.30.0） R/Bioconductor套件。为了鉴定具有差异表达的基因作为样品的函数，在重新开放关键周期的情况下，我们进行了一个似然比测试，比较了包括批处理的完整模型，以及关键时期与仅包括批处理的简化模型。在此模型拟合中，时间没有用作解释变量。使用此测试，我们以10％的错误发现率（Benjamini – Hochberg校正的Q≤0.1）确定了65个基因为显着差异表达。为了鉴定具有差异表达的基因作为任何药物治疗（包括可卡因）与盐水的函数，我们进行了可能性比率测试，比较了包括批处理的完整模型，以及“未经处理的与未经处理的”模型与仅包括批次的降低模型进行了比较。使用此测试，我们以15％的错误发现率（Benjamini – Hochberg校正的Q≤0.15）确定了39个基因为显着差异表达。在此模型拟合中，时间没有用作解释变量。原始数据将公开可用（基因表达综合登录编号：GSE230679和GSM7231202 – GSM7231228）。复制RNA-seq分析和相关数字的代码作为补充代码2以及在https://github.com/genesofeve/dolenpsychedelicopenstate的存储库中提供。

　　所有统计细节都可以在图图中找到，包括所使用的统计分析的类型，P值，N，自由度，T值和F值。样本量未通过统计方法预先确定。相反，它们是根据先前发表的文献进行估算的。假定数据分布是正常的。使用Levene的方差平等测试测试了方差的同质性。使用两尾学生t检验（配对或不配对，以及不适合韦尔奇的校正）和MANOVA进行比较，以比较多种结果指标，而P <0.05被认为是重要的。

　　线性，β-spline，黄土平滑和天然样条模型在先前发表的归一化社会偏好得分的时间过程中进行了评估11。黄土平滑在41.695岁时产生了伪内，并且为β-Spline和自然样条模型选择了35的结。天然样条的表现优于β-Spline（分别为0.1053对0.5554的调整后R2），参数较少。绘制残留物与合适的值和年龄进行检查，以检查模型假设。留下一个交叉验证也用于评估模型拟合。通过预测R函数将所有新实验的控制数据用作测试数据。RSME和R2值在原始模型和新数据之间是可比的。进行了双向t检验，以比较控制组的手段与匹配或binned时间段的时间段以确认适合新数据。完整的模型包括花纹系数，实验和条件的系数，并针对还原模型进行了测试，并报告了最终减少模型。使用多元线性模型和ANOVA函数进行MANOVA分析。所有统计比较均在R编程语言中进行，可以在补充代码3和4以及https://github.com/genesofeve/dolenpsychedelicopenstate中找到。

　　有关研究设计的更多信息可在与本文有关的自然投资组合报告摘要中获得。