这项研究是在18-55岁的健康男性和女性中进行的，以评估各种BNT162 MRNA疫苗候选物的上升剂量水平的安全性，耐受性和免疫原性。在此处报道的一部分研究中，在美国的两个地点进行了三个剂量水平（10μg，30μg或100μg）候选者的评估。这项研究使用了哨兵队列设计，并在每个剂量水平上审查了哨兵队列的数据后进行进展和剂量升级。该研究在ClinicalTrials.gov（NCT04368728）上进行了注册。这项研究的第一阶段部分是在现场级别观察的。研究人员对参与者级的研究干预作用视而不见。但是，调查人员并未对本文包含的数据集的小组级分配视而不见。

　　关键排除标准包括患有人类免疫缺陷病毒，丙型肝炎病毒或丙型肝炎病毒感染的人；免疫功能低下的个体和患有自身免疫性疾病史的人；and those with increased risk for severe COVID-19, previous clinical or microbiological diagnosis of COVID-19, receipt of medications intended to prevent COVID-19, previous vaccination with any coronavirus vaccine, a positive serological test for SARS-CoV-2 IgM and/or IgG at the screening visit, and a SARS-CoV-2 nucleic acid amplification test-positive nasal swab within 24 h before study vaccination.

　　最终协议和知情同意文件已由机构审查委员会批准了每个参与研究中心。这项研究是根据所有国际统一良好临床实践指南和赫尔辛基宣布的道德原则进行的。在进行任何特定研究活动之前，需要采取签署和过时的知情同意书。

　　在本报告中，介绍了以下研究主要终点的结果：在疫苗接种后的7天内，在疫苗接种，不良事件和严重的不良事件后7天内，报道了征求局部反应，系统性事件和使用止热和/或止痛药的参与者的比例（可用于剂量1后45天）以及与临床实验室的临床实验室和7天相比的比例（可用于45天），并在临床实验室中施加了1天和7天的施加，并在临床实验室中施加了1和7天的施用。剂量1后的7天，剂量2后2至7天之间。次级终点包括：SARS-COV-2中和gmts和SARS-COV-2 RBD结合IgG GMCS 7和21天后剂量1和剂量2后7天和14天。

　　使用基于Web的响应技术系统将研究参与者随机分配给疫苗组，其中每个组为15名参与者（12名主动疫苗接收者和3名安慰剂接受者）。参与者接受了两种0.5毫升剂量的BNT162B1或安慰剂，该剂量通过肌内注射到三角肌肌肉中。

　　BNT162B1融合了一种良好的制造练习级mRNA药物，该药物编码修剪的SARS-COV-2尖峰糖蛋白RBD抗原。抗原的编码序列已与GenBank沉积（登录号，MN908947.3）。mRNA用脂质作为mRNA-脂质纳米颗粒药物制成。将疫苗作为缓冲液溶液提供用于肌内注射的液，并存储在-80°C下。安慰剂是用于注射的无菌盐溶液（0.9％氯化钠注射，以0.5毫升剂量）。

　　安全评估包括疫苗接种后的4小时观察（对于每组疫苗接种的前5名参与者），或30分钟的观察（对于其余参与者）即时不良事件。安全评估还包括自我报告的局部反应（注射现场发红，肿胀和疼痛），全身性事件（发烧，疲劳，头痛，发冷，发冷，呕吐，呕吐，腹泻，肌肉疼痛，肌肉疼痛和关节疼痛），在接种后进行7天的抗精神热治和/或止痛药物的使用，并在接种术后进行了7天的次要事件，并进行了反对事件。在筛查时，第一次剂量后1和7天进行了血液学和化学评估，第二剂剂量后7天进行了评估。

　　所有哨兵队列参与者都有协议指定的安全停止规则。内部审查委员会和外部数据监测委员会均审查了所有安全数据。在本报告发布之前，没有遵守停止规则。

　　38个人类SARS-COV-2感染和/或Covid-19康复血清是从18-83岁的参与者中汲取的，至少是PCR确认诊断后的14天，并且在参与者无症状的时候。捐助者的平均年龄为45岁。捐赠者亚组中的GMT中和GMT如下：≤55岁，82岁（n = 29）；> 55岁，142岁（n = 9）;有症状的感染，90（n = 35）;无症状感染，156（n = 3）。住院的一个人的抗体滴度为618。血清是从Sanguine Biosciences，MT组和辉瑞职业健康和健康中获得的。

　　对于免疫原性评估，在每次研究疫苗接种之前，在第一次剂量后的7和21天以及第二剂剂量后的7天和14天收集了50 mL的血液。在RBD结合IgG测定中，重组SARS-COV-2 RBD含有C末端AVITAG（ACRO BIOSYSYSTAGS，SPD-C82E9），并且没有foldon结构域与链霉亲素涂层的Luminex Microspheres必应。In brief, 1.25 × 107 microspheres/ml were coated with streptavidin by 1-ethyl-3-[3-dimethylaminopropyl] carbodiimide hydrochloride reaction.重组RBD AVITAG通过在室温下孵育90分钟，摇动（35 rpm），将重组rbd avitag耦合到链霉亲蛋白珠。在室温下，将珠子在1％BSA缓冲液中阻塞30分钟。参与者的热灭活血清在测定缓冲液中稀释1：500，1：5,000和1：50,000（PBS为0.5％BSA，0.05％Tween-20和0.02％硫氮化钠）。在2-8°C与摇动（300 rpm）的16–20小时孵育后，将板在含有0.05％Tween-20的溶液中洗涤3次。然后将R-磷酸二氧化衣偶联的山羊抗人多克隆抗体（Jackson Labs）添加到室温度下90分钟的室温（300 rpm）中90分钟。然后在包含0.05％Tween-20的溶液中将板洗涤最后一次。使用Luminex读取器将数据捕获为中位荧光强度，并使用参考标准曲线转换为U/ML抗体浓度，其任意分配的浓度为100 U/mL，并考虑了血清稀释因子。参考标准由五个Covid-19康复性血清样品池组成（PCR诊断后14天> 14天）。使用三种稀释液来增加至少任何样品的结果将在标准曲线的可用范围内的可能性。在u/mL的IgG中报告了测定结果。最终测定结果表示为在测定范围内产生有效测定结果的所有样品稀释液的GMC。

　　SARS-COV-2中和测定法使用了先前描述的SARS-COV-2（USA_WA1/2020）菌株，该菌株是通过反向遗传学营救的，并通过将Mneongreen基因插入病毒基因组25的开放阅读框架7中进行了设计。该记者病毒与野生型病毒产生类似的斑块形态和无法区分的生长曲线。如前所述25，在Vero E6细胞中生长了用于中和测定的病毒主库存（每毫升2×107斑块形成单位）。在测试患者康复性血清标本时，荧光中和测定结果可与常规的牙菌斑减少中和分析产生可比的结果26。简而言之，将来自参与者的热灭活血清的连续稀释液与报告基因病毒一起孵育，以在37°C下在37°C下的感染率约为10–30％）在37°C下1 h，然后再接种Vero Ccl81细胞单层单层单层单层（靶向8,000-15,000个细胞）在96粒细胞中的量子量为8,000-15,000个细胞，以启用96粒细胞，以启用精确量的精确量。通过核染色（HOECHST 33342）列举了每孔的总细胞计数，并在接种7细胞成像的多模式读取器（Biotek）的Gen5 Image Prime V.3.09后，检测到荧光病毒感染的灶。通过在每种系列血清稀释下产生中和百分比中和，在GraphPad Prism v.8.4.2中计算滴度。50％中和滴度据报道是稀释的插值倒数，荧光病毒灶降低了50％。

　　研究部分的样本量不是基于统计假设检验。通过描述性摘要统计数据评估了主要的安全目标，每种疫苗组的局部反应，全身性事件，异常血液学和化学实验室参数，不良事件和严重的不良事件。在各个时间点，二级免疫原度目标总结了描述性。所有可用数据的参与者都包括在安全性和免疫原性分析中。

　　有关研究设计的更多信息可在与本文有关的自然研究报告摘要中获得。