2025-06-22 22:00来源:本站
A,蛋白质印迹结果显示了ND6-L1397N(WT)在2×103 HEK293T细胞的不同亚细胞级分中未经处理或使用Lipofectamine 2000或LTX转染的2×103 HEK293T细胞的分布。以及用LTX转染的不同级分中ND6-L1397N的三个缺失变体的分布。“无DDDA”,“无UGI”和“无故事”是指ddda,ugi和Tale Arrays的删除分别从全长的ND6-L1397N中删除。结果表明,无论使用哪种转染试剂,ND6-L1397N都会部分定位在染色质分数中。染色质分数中无故事构建体的信号仅在延长曝光时间时才存在。该观察结果表明,与DDDA和UGI相比,故事阵列最强烈影响核定位。选择ATP5A(线粒体),GAPDH(胞质)和H3(染色质)作为隔室特异性标记,证明每个亚细胞分数的纯度。HA(左标记为半标记)和标记(右半标记)用于指示DDCBES的定位。分子量在KDA中给出;图像代表了2种独立的生物学重复;样品是从同一批实验中得出的,并并联处理凝胶。b,在固定核中,使用ND6-L1397N(WT)使用ND6-L1397N(WT),使用ND6-L1397N(WT),使用ND6-transfn76,b,使用ND6-L1397N(WT)使用ND6-L1397N(WT),使用ND6-L1397N(WT),使用ND6-transfn76,在HEK293T细胞中分离出固定核中的核(DAPI,蓝色),HA标记的一半(抗HA,红色),右半标记的右半(抗frag,绿色,绿色)。使用Lipofectamine LTX无DDDA,无UGI和无故事的构建体。Mitotracker(Magenta)测试了可能的线粒体污染。结果表明,无论转染条件如何,DDCBE的一小部分位于核中。与DDDA和UGI相比,故事阵列更强烈地影响核定位。比例尺,在无故事的图像中放大为5μm; 所有剩余图像的40μm。这些图像是在相同的暴露条件下获得的,并代表了2个独立的生物学重复。