所有实验均根据英国内政部批准并根据《动物（科学程序）法》发布的项目许可进行。这项研究在混合CBA上使用了CSF1RFIREδ/δMice：C57BL6J背景，CSF1RFIREΔ/+交叉，PLPCREERT小鼠（Jackson Laboratories）和TGFBR1FL/FL小鼠（由S. S. Karlsson，Lund University提供）的野生型对照。通过给药4-羟基tamoxifen（100 mg kg – 1，腹膜内； Sigma-Aldrich），在PLPCREERT; TGFBR1FL/FL小鼠中诱导了重组。在12小时的浅色周期中，所有笼子中最多可容纳所有动物，最多可容纳食物和水。对于动物实验，样本量是通过使用OpenEPI软件（OpenEPI.com）通过正常近似方法通过两侧95％置信区间计算得出的功率分析确定的，所有实验的功率> 80％。在整个研究过程中都使用了雄性和女性，除了开放野外实验，仅使用雄性小鼠。随机分析动物。遵循ARRE22指南，以提供实验，定量和报告的详细信息。

　　根据制造商的说明，使用向导SV基因组纯化系统（Promega）从耳朵活检组织中提取基因组DNA。如前所述1010，使用PCR策略对CSF1RFIREΔ/δ小鼠进行基因分型。如先前针对PLPCREERT MICE51和TGFBR1FL/FLMICE 52所述，用从尾巴提取的基因组DNA进行了PLPCREERT; TGFBR1FL/FL小鼠的基因分型。

　　小鼠用4％多聚甲醛（PFA； W/V; Sigma）对小鼠进行灌注，并将大脑固定过夜，并在蔗糖中冷冻保护，然后将OCT（组织）储存（组织）和-80°C的储存。在PBS中，用5％正常马血清（Gibco）和0.3％Triton-X-100（Fisher Scientific）对冷冻切片（10μM）进行气干，透化并阻塞1小时。对于髓磷脂蛋白染色，将切片在-20°C下在甲醇中透化10分钟。对于EDU可视化，在免疫染色之前使用Alexafluor-555 Click-It Edu细胞增殖试剂盒（Invitrogen）。将切片用0.5％Triton X-100在室温下（20–25°C）在PBS中透化20分钟，然后在室温下在室温下在黑暗中孵育30分钟，然后在PBS中洗涤。在施用初次抗体之前，进行了热诱导的抗原检测。将原代抗体在4°C的潮湿室中施用过夜，其中包括：MBP（ABD Serotec，1：250; MCA409S，克隆12）;MAG（Millipore，1：100; Mab1567，克隆513）;MOG（Millipore，1：100; Mab5680，克隆8-18C5）;CNPase（Sigma-Aldrich，1：100; Amab91072，clone cl2887）;TMEM119（ABCAM，1：100; AB209064，克隆28-3）;iba1（abcam，1：500; ab5076）;CD206（ABCAM，1：100; AB64693）;CD31（R＆D Systems，1：100; AF3628）;lyve1（abcam，1：100; ab14917）;Olig2（Millipore，1：100; AB9610，克隆211f1.1）;APC/CC1（ABCAM，1：100; AB16794，克隆CC1）;Sox9（Millipore，1：500; AB5535）;GFAP（剑桥生物科学，1：500; 829401）;神经丝H（Biolegend，1：100,000； Covance，PCK-592P）;和PLP（ABCAM，1：100; AB28486）。对于SERPINA3N免疫染色，将6 µm厚的福尔马林固定石蜡包裹的切片脱蜡，再合化，然后在基于柠檬酸盐的抗原抗原透明液（H-3300-250，H-3300-250，载体实验室）中放置在85°C的水浴中30分钟。随后将部分冲洗在PBS中，并使用具有10％驴血清（D9663，Sigma Aldrich）和0.2％Triton X-100的PBS阻塞1小时（T8787，T8787， Sigma Aldrich）。然后将部分在抗Serpina3n（R＆D系统，1：100; AF4709）和抗Olig2（Millipore，1：500; AB9610）的PBS中在4°C下孵育过夜，在5％驴血清中，PBS中的PBS和0.1％Triton X-100，然后在0.1％Triton X-100中，然后在0.05％tween-een-eeen-tween-een-een-eeen-een-eeen-een-eeen-een-een-eeen-eeen-eeen-pbs中清洗了三次。在潮湿的腔室中，在室温下施用荧光偶联的二抗（1：500，生命技术 - 分子探针）。与Hoechst或DAPI对抗后，用Fluoromount-G（Southern Biotech）覆盖了幻灯片。对于TGFβR1对火δ/δ小鼠的免疫染色，在用0.001％Triton X-100（Sigma）洗涤TBS后，将切片在抗原卸载溶液（pH 6柠檬酸盐缓冲液，载体实验室）中微波炉进行，然后在60°C下加热30分钟。冷却后，将切片用TBS和0.001％Triton X-100洗涤一次，内源性磷酸酶和过氧化物酶活性用Bloxall（Vector）封闭10分钟。用10％热灭活的马血清（Gibco）和0.5％Triton X-100在TBS中进行阻塞1小时。在4°C的潮湿室中施加稀释溶液中稀释溶液中稀释的一抗。使用的抗体包括TGFβR1（ABCAM，1：100; AB31013）和Olig2（Millipore，1：100; MABN50）。在带有0.001％Triton X-100的TBS中进行三次洗涤后，在潮湿的室内在室温下将过氧化物酶偶联的二抗（载体）施加1小时。进一步洗涤后，使用蛋白石520（Akoya）在1：100中开发了切片，加上放大稀释剂（Akoya）在潮湿的腔室中持续10分钟。洗涤载玻片，并通过施加Bloxall（载体）10分钟来淬灭残留的过氧化物酶活性。为了进行共染色，然后使用过氧化物酶偶联的二抗和OPAL 650（Akoya）在1：100中使用另一种原代抗体，并在加上放大稀释剂中使用，如上所述。在TBS中洗涤后，将部分用Hoechst（1：10,000）抗染色，并用荧光素-G安装 （Invitrogen）。

　　将切片成像在Leica Spe或Zeiss LSM 510共聚焦显微镜上成像。细胞计数是根据使用fiji/imagej（fiji.sc）的循环度的假设来计算的，每个部分都定量了感兴趣的三个区域。使用Imaris软件v.9.7对SOX9和GFAP进行了共定位分析。

　　无酶的脑解离方案用于收集蛋白质细胞富集的细胞悬浮液，以探索CSF1R（CD115）表面蛋白水平。在经常性灌注10–11周龄的雌性小鼠的冰冷PBS之后，用HBSS中的22A手术刀解剖并切碎了25 mm HEPES（10041703，Fisher Scientific）的HBSS（没有Ca2+和Mg2+; 14175-053，Gibco）。然后使用HBSS中的HBSS（不含Ca2+和Mg2+）的Dounce均质器（D9938，Kimble）均质匀浆，并具有25 mM HEPES。使用35％的Percoll梯度分离脑匀浆，在4°C下以800克离心20分钟（没有制动器）。收集细胞颗粒并在PBS（无CA2+和MG2+; 14190-094，GIBCO）中洗涤，其中0.1％低内毒素BSA（A8806，Sigma Aldrich）。将FC受体阻塞（1：100; 101302，Biolegend）在4°C的振动筛上15分钟。Cells were then stained with primary antibodies directed against CD11b (PE; 1:200; 101207; BioLegend, clone M1/70), CD45 (PECy7; 1:200; 103114; BioLegend, clone 30-F11) and CD115 (APC; 1:200; 135510; BioLegend, clone AFS98) for 30 min at 4 °C on a shaker.然后将样品洗涤并重悬于PBS（无CA2+和MG2+）中，并用0.1％低内毒素BSA进行洗涤。单氟色素染色的珠子，未染色的样品和荧光减去一个样品作为对照。DAPI用于细胞活力门控。使用BD LSRFORTESSA流式细胞仪获取数据。FCS Express 7用于收购后数据分析。

　　在0.1 M磷酸盐缓冲液中，用4％PFA（w/v）和2％戊二醛（V/V； TAAB实验室）对小鼠进行内部灌注。将组织在4°C下固定过夜，并转移至1％戊二醛（v/v）直至嵌入。将组织切片（1 mm）固定在1％四氧化os骨中，并在加工成araldite树脂块之前脱水。接下来，使用Zeiss Axio显微镜在明亮场成像之前，用1％甲苯蓝/2％硼酸钠溶液染色1μm微型切片切片。从callosum callosum样品中切割超薄切片（60 nm），用乙酸铀酰和柠檬酸铅染色，并在JEOL透射电子显微镜上成像的网格。轴突直径，髓磷脂和内舌厚度是根据使用fiji/imageJ（Fiji.sc）（直径= 2×√[区域/π]）的圆形假设计算的，每只动物分析了100-200个轴突。

　　在行为测试和数据分析期间，实验者对基因型视而不见。所有实验均在维持在20°C的恒定温度下的行为测试室中进行。在4-8周和11-13个月大时，对雄性小鼠进行了开放式测试，以评估运动活动和焦虑相关的行为。处理前3-4天进行处理。将小鼠放置在空旷的田地（47×47厘米）中，以自由探索竞技场10分钟。每次测试之间用70％乙醇清洁设备以清除气味。使用视频跟踪软件Any Maze（StoeLting Europe，v.6.3）自动量化了在边缘（距墙壁9厘米）（29×29 cm）中所花费的时间（距墙壁9厘米）（距离墙壁9厘米）（29×29厘米）的时间（距墙壁9厘米）（29×29厘米）的时间（距墙壁9厘米）（距墙壁9厘米）（距离为29厘米）（距离为29厘米）。Barnes迷宫测试是在成年小鼠2-4个月大时进行的，以评估空间学习，记忆和认知灵活性。迷宫由一个白色圆形平台组成，外边缘周围有20个圆形孔，直径为91.5厘米，高度为115厘米（圣地亚哥仪器）。一个黑暗的逃生室附着在其中一个孔上，每只小鼠的逃生室位置保持恒定，但在连续的小鼠之间顺时针旋转90°，以避免嗅觉提示的遗留。使用灯和头顶灯（450 Lux）来点亮迷宫。试验开始后，播放了85 dB时的厌恶白噪声刺激，直到老鼠进入逃生室。迷宫周围的窗帘和墙壁上都有视觉提示。每次试验开始时，动物被保留在白色保持圆柱体（直径为10.5厘米）中。在每次试验之间，用乙醇清洁迷宫和逃生室，以避免动物之间嗅觉线索的结转。使用基于视频的自动跟踪软件Any Maze（Stoelting Europe，v.4.99）记录所有试验。测试之前， 实验者每天将小鼠每天处理3-5分钟6-7天。将动物带入测试室，并放入固定圆柱体中，以适应测试环境10 s，持续2天。在学习阶段开始前1天，将小鼠习惯于迷宫和逃生室，从而将每只小鼠放在保持圆柱体中10 s，然后允许在没有厌恶刺激的情况下自由探索迷宫，持续3分钟。然后将小鼠引导到逃生室，并在内部保留1分钟。在学习阶段（T1-T6）中，训练小鼠连续6天，每天进行2次试验（1 h审判间隔）连续6天定位逃生室；每天平均每只鼠标数据。如果小鼠在3分钟试验期间未能进入逃生室，则实验者将其引导到腔室。通过在每个试验中找到逃生室（主要潜伏期；由进入腔室的头部定义）所花费的总时间来评估空间学习，并通过在找到逃生室之前遇到的错误数量来评估空间工作记忆的数量（主要的错误；由鼻子有意定义，由头部和颈部或颈部或颈部或颈部或颈部延伸到一个孔中）。还测量了试验期间的总距离和速度。在数据分析之前定义了排除标准：小鼠必须在前五个试验的两个试验中至少输入三个迷宫的象限，并且必须在前三个试验中进入逃生室。由于拒绝进入腔室，将一只野生型和一只敲除小鼠排除在分析之外。最后一次试验后的1小时和3天， 进行了探针测试，从而使小鼠可以在去除逃生室的情况下探索迷宫1分钟。记录了迷宫的目标象限和每个孔中的鼻子戳数的时间，以评估逃生室位置的记忆。为了评估认知灵活性，小鼠进行了逆转学习阶段（R1 – R3），从而使逃生框从原始位置移动至180°，并如上所述进行测量。最终反转试验后3天还进行了探针测试。接受训练和未经训练的小鼠的中位年龄是在安乐死时进行免疫荧光或电子显微镜分析时基因型之间可比的：未经训练的火+/+/+/+和fireΔ/δ小鼠为118天，训练有素的火灾+/+小鼠是119天，训练有素的火灾和训练有素的fireg/δ小鼠，是120天。

　　从试验第1天结束到实验结束时，EDU以0.2 mg mL – 1的速度溶解在0.2 mg mL – 1的饮用水中。每隔一天交换水，并监测摄入量以评估是否消耗了一致的量。

　　CSF1R抑制剂PLX5622（Chemgood，C-1521）以1,200 ppm的浓度（研究饮食，D11100404i）配制成Chow，并在1个月中喂食2个月大的野生型（Fire+/+）小鼠1个月，并在1个月中供电。

　　TGFβ信号传导激动剂SRI-011381盐酸盐（HY-100347A，剑桥生物科学/Medchem Express），溶解在含有DMSO（10％）和PEG300（40％）（40％）的PBS中，注入了腹腔内注射到30 mg kg-g kg-g kg-g kg-gg-g kg-g kg-1 pereperieneation interapition offeritiene，并注入了30 mg-g kg-g kg-g kg-g kg-g kg-g kg-g kg-g kg-g kg-1 3次。如上所述。

　　在用PBS灌注后，从火Δ/δ的2 mM冠状切片和野生型大脑和液氮中的Snap-Frozen中剖析了call体。将样品在含有磷酸酶和蛋白酶抑制剂（Sigma-Aldrich，4906845001和11836170001）的RIPA缓冲液（Millipore，20-188）中匀浆。call体裂解物样品被激活，并根据制造商的血清和血浆样品的说明，以1:10的最终稀释来通过ELISA（Biolegend，436707）测量TGFβ1蛋白水平。进行了BCA分析以根据制造商的说明（Thermo Fisher Scientific，23225）测量总蛋白质，并将每个样品的值标准化。

　　每只动物的同一时间从6-7周龄的雌性小鼠收集大脑。用宫颈脱位将小鼠剔除，并用嗅球和小脑去除大脑。Hippocampi from both hemispheres and the remainder of the left hemisphere (without the hippocampus) were collected in ice-cold HBSS (without Ca2+ and Mg2+; 14175-053, Gibco) with 5% trehalose (T0167, Sigma Aldrich) and 30 µM actinomycin D (A1410, Sigma Aldrich) and were finely minced使用22A手术刀。使用AN成人脑解离试剂盒（130-107-677，Miltenyi Biotec）消化大脑，并进行以下修饰：（1）如神经组织解离基准方案的“手动解离”部分中所述分离组织（130-092-628，MILTENYIIIIIIECEC）；（2）在35°C下进行酶消化；（3）使用酶P的一半；（4）放线霉素D用于限制解离引起的转录变化；（5）在所有缓冲液中添加5％的海藻糖以增加细胞活力；（6）通过过滤通过预磨的70μM（352350，猎鹰）和40μM（352340; Falcon）细胞滤网去除细胞簇；（7）在解离步骤中省略了红细胞和髓磷脂碎片去除步骤；（8）所有离心均在4°C下在200克进行。解离后，将细胞收集在用0.2％BSA的PBS中收集，然后在Sony SH800细胞分类器上进行分类。根据前向和侧面散射选择门，以排除髓磷脂碎片，红细胞和双重弹药。根据DRAQ7和/或DAPI染色（DRAQ7HIGH和/或DAPIHIGH细胞被分类为不可生存），排除了不可生存的细胞。分类后确认细胞的活力后，使用锥虫蓝和脱瘤仪，使用铬的铬铬铬在铬单细胞平台上处理单细胞，下一个GEM单细胞3'GEM库和凝胶珠库（V.3.1 Chemistry，pn-1000121，10x Genomics） 以及铬的下一个宝石芯片套件（PN-1000120），并按照制造商的说明进行处理。使用Novaseq 6000测序系统（PE150（HISEQ），Illumina）对库进行测序。

　　Alignment to the reference genome, feature counting and cell calling were performed following the 10x Genomics CellRanger (v.5.0.0) pipeline, using the default mm10 genome supplied by 10x Genomics (https://cf.10xgenomics.com/supp/cell-exp/refdata-gex-mm10-2020-A.tar.gz).从输出中，使用过滤后的矩阵进行下游分析。预处理是在爱丁堡大学的计算集群埃迪（Eddie）上进行的。用R v.4.1.1进行分析。可以在GitHub（https://github.com/anna-williams/veronique-firemice）上找到的代码脚本中找到以下分析管道的完整详细信息。使用数据集特异性参数根据基因和每个细胞的唯一分子识别仪（UMIS）进行单细胞实验对象进行单细胞v.1.14.1处理R中的单细胞实验对象，每个单元格，这两个参数之间的比率和小节基因读取每个细胞的百分比。用Scater（v.1.20.1）的ISOUTLIST函数计算阈值，因为批量6的质量比其他批次较差，具有离群值，因此使用了子集参数。在至少两个细胞中仅检测到的基因。使用SCRAN（v.1.20.1），通过反卷积将数据进行标准化，并选择了顶部15％的高度可变基因。在主成分分析（PCA）之后，保留了25个主要成分（PC）以进行下游分析（通过检查肘部图）进行了下游分析。非线性尺寸维度表示和T-分布的随机邻居嵌入（T-SNE）和基因表达方差通过批处理解释（用SCOTATER计算）表明需要进行批次校正。使用fastMNN，batchelor（v.1.8.0）的共同最近邻居进行批处理校正。最后，使用基于图的聚类方法使用SCRAN的clusterCells函数将细胞聚类，k = 60。簇的簇簇的簇标记最高（PLP1，PLP1， MOG，MAG和MBP）且未表达其他细胞类型标记（例如，星形胶质细胞，少突胶质细胞祖细胞或小胶质细胞标记）分别进行分析。进一步调整细胞和基因质量控制，设置更严格的UMI计数阈值（5,000 UMIS）和线粒体基因的最大百分比读取每个细胞（10％）。分析也排除了基于新阈值的一小部分质量较低的单元格（扩展数据图10）。最终，我们总共包括了19,506个基因和13,583个细胞。如上所述，用子集数据集重复进行归一化，特征选择，尺寸降低和批化校正。聚类是在不同的分辨率下进行的，在使用Clustree（V.0.4.4）检查后，选择了K = 100，然后合并为四个簇（图6A和扩展数据图10）。群集1（特异于火δ/δ小鼠）和所有其他细胞的平均表达之间的差异基因表达是使用Seurat（v.4.1.0）的Findmarker（补充表1）进行的。Shinycell v.2.1.0用于产生交互式应用，org.mm.eg.db v.3.13.0用于注释基因。GGPLOT2 v.3.3.5用于执行自定义图，此处使用V.1.0.1来确保可重复的路径，并且矩阵V.1.3.4用于处理稀疏的矩阵。

　　将来自火+/+和火δ/δ小鼠的call体样品在700μl的PBS中稀释，使用800μL1N HCl：CH3OH 1：8（V/V），900μLCHCL3和200μgml-1的抗氧化剂2,6-二甲基2-6-二甲基二甲基-4-4-4-甲醇（bht）;将Lipidomix质量规格标准（3μL； Avanti极性脂质）添加到提取物混合物中。使用Savant Speedvac SPD111V（Thermo Fisher）在室温下蒸发有机分数，并将其余的脂质颗粒在100％乙醇中重构。通过液相色谱电喷雾电离串联质谱法（LC – ESI – MS/MS）在Nexera X2 UHPLC系统（Shimadzu）上与杂种三倍四倍/线性离子离子TRAP质谱仪（6500+ Qtrap System;色谱分离在Xbridge酰胺柱（150×4.6 mm，3×5μm；水域）上进行35°C维持在35°C下（使用流动相A（1毫米乙酸铵在水和乙腈5:95（v/v））中，在水和Acetrile actientrial and Acetrile in cetient cartirile and Acetrile in Criles in Cartirile in Cartirial in Crile in car0–6分钟：0％b;6％b;6-10分钟：6％B；25％b;10–11分钟：25％b;98％b;11–13分钟：98％b;100％b;13-19分钟：100％b;19–24 min：0％B。将流速设置为0.7 mL min – 1，从13分钟开始，该流量增加到1.5 ml min – 1。鞘磷脂和胆汁固醇酯以阳性离子模式测量，前体扫描为184.1，369.4。甘油三酸酯，二甘油三酸酯和甘油三酯在正离子模式下测量，其中一个脂肪酰基部分中性损失扫描。磷脂酰胆碱，磷脂酰乙醇胺，磷脂酰甘油，磷脂酰肌醇和磷脂酰酶酶通过脂肪酰基片段以负离子模式测量。脂质定量是通过计划的多个反应监测进行的，其过渡基于中性损失或典型的产物离子，如上所述。仪器参数设置为如下：窗帘气体= 35 psi；碰撞气体= 8 a.u.（中等的）; 离子喷雾16电压= 5,500 V和-4,500 V;温度= 550°C；离子源气1 = 50 psi;离子源气体2 = 60 psi;换电势= 60 V和-80 V;入口电位= 10 V和-10 V;和碰撞电池出口电位= 15 V和-15 V.使用多物TM软件v.3.0.3进行了峰积分。校正同位素贡献的脂质物种信号（使用Python Molmass 2019.1.1计算），并根据内标信号进行量化，并遵守脂质标准标准计划的指南。

　　来自ALSP的个体和未受到非神经学病因（扩展数据表1）的未受影响的个体的验尸组织是在女王Square Square Brain Brank神经疾病的完全道德批准中获得的，UCL Queen Square神经病学研究所，他们的使用符合供体组织和信息的知识同意的使用。国家卫生服务卫生研究局通过伦敦中央研究伦理委员会授予了女王方形大脑银行使用伦理批准，用于使用组织。根据CSF1R的突变和神经病理学手段，确认了ALSP的诊断，并且Z. Jaunmuktane（伦敦大学学院）提供了临床病史。将福尔马林固定的石蜡嵌入的组织块切成10μm厚度。将切片在60°C的烤箱中放置10分钟，并通过一系列的组织清液（2×10分钟）和乙醇（100％两次，95％，70％，70％，50％；每个5分钟）进行脱蜡。在PBS洗涤后，将载玻片放在载体卸载溶液中的压力锅中20分钟，冷却，洗一次，用5％正常马血清（Gibco）和0.3％Triton X-100（Fisher Scientific）在PBS中封闭1小时。将组织与潮湿室中的原代抗体孵育过夜。然后将切片在PBS中洗涤，并在潮湿的腔室中在室温下施用荧光偶联的二抗（1：500，生命技术 - 分子探针）。在PBS和水中洗涤后，将切片用Hoechst染色，并用蒸馏水洗涤20分钟。然后用Fluoromount-G（Southern Biotech）覆盖载玻片。初级抗体包括IBA1（ABCAM，1：500; AB5076）和Lyve1（Abcam，1：100; AB14917）。使用Zeiss Axioscan Z.1 Slidescanner和Zeiss Zen2软件（蓝色版）对整个组织切片进行成像。在每种情况下，每个感兴趣区域计数三个场的150×150μm，并计数乘以确定每MM2的免疫阳性细胞的密度。

　　ALSP组织是从Charité-Universitätsmedizin柏林神经病理学系获得的，并从各个道德审查委员会批准的爱丁堡大脑和组织库中获得了来自未受影响的个体的组织。白质的ALSP组织样品固定在2.5％的戊二醛中，在0.1 m cacodylate缓冲液中在4°C下固定48小时。将样品在1％四氧化碳化物中固定在0.05 m的cacododlate缓冲液中3小时，在分级丙酮系列中脱水，包括用1％乙酸铀酰乙酸铀酰和0.1％磷酸化的EN BLOC染色，在60分钟内，在70％丙酮的步骤中，并在含有Araldite resin中的70％丙酮。对于来自未受影响的个体的组织，用乙酸铀酰染色和柠檬酸铅染色，并用Zeiss P902电子显微镜成像。对于ALSP组织，制备了具有限制性人工制品的超薄切片，并使用Zeiss Gemini 300扫描电子显微镜完全数字化，并具有扫描透射电子显微镜。简而言之，我们使用了29 kV加速度电压，5 nm像素大小和1.5 µs梁居住时间进行数字化和fiji/trakem2进行缝线，以允许使用0.3.0进行Quath的深入分析。

　　所有手动细胞计数均以盲目的方式进行。数据表示为平均值±S.E.M.所有显微照片都是结果的代表性图像，它们至少重复了三次。精确的n值在相应的定量图中表示。在统计测试之前，使用Shapiro -Wilk测试评估了数据的正态性。统计测试包括针对非参数数据的正态分布数据或Mann-Whitney测试的两尾学生的t检验，对Sidak的多重比较测试的双向方差分析（ANOVA）进行了比较两组的多重比较测试，以及用于比较2（折叠变化）的单样本t检验，用于比较0。用于比较的值。为了对初级延迟和错误的巴恩斯迷宫分析，使用了Sidak的多重比较测试的重复测量双向方差分析。在测试探针测试数据中的组间差异之前，使用一个样本t检验对机会（25％）测试了每个基因型。使用简单的线性回归分析比较了髓磷脂和内舌厚度与轴突直径的斜率，以及为了比较两组以上的Kruskal -Wallis与Dunn的多重比较测试。p值<0.05被认为是显着的。使用Microsoft Excel和GraphPad Prism软件进行数据处理和统计处理。

　　有关研究设计的更多信息可在与本文有关的自然投资组合报告摘要中获得。